culture preservation

定義：用適宜方法將微生物的代謝速率降至最低，使其長期存活、不被污染、不易衰退、原有生物學特性穩(wěn)定，便于以后使用的儲存過程。

學科：微生物學_微生物學技術

相關名詞：斜面保藏 冷凍干燥保藏法 液氮保藏 菌懸液

圖片來源：視覺中國

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菌種保藏是指保持微生物菌株原有的各種特征和生理活性的技術，其原理是根據(jù)微生物生理生化特點，人為創(chuàng)造環(huán)境條件，使微生物長期處于代謝不活潑、生長繁殖受抑制、生命活動處于半永久性休眠的狀態(tài)。常用的菌種保藏方法有斜面保藏法、冷凍干燥保藏法、液氮保藏法、砂土管保藏法和瓊脂穿刺保藏法等。

斜面保藏法是將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，待菌種生長完全后，置于4℃冰箱中保藏，適用于細菌、酵母、放線菌、霉菌的短期保藏。斜面保藏法方法簡單、菌種存活率高，但其缺點是菌株仍有一定強度的代謝活動，因此保存時間不長、傳代多、菌種容易變異。

冷凍干燥保藏法是用保護劑制備菌懸液，將菌懸液快速降溫凍結，再通過減壓抽真空使凍結物中的水分升華成水蒸氣排出（脫水干燥），在真空狀態(tài)下立即密封瓶口，管內呈真空狀態(tài)，最后將密封瓶置于低溫保藏。此方法廣泛適用于細菌、酵母、霉菌孢子、放線菌孢子和病毒等的保藏，保存期可達一至數(shù)十年之久，并且存活率高、變異率低。此方法的缺點是步驟較多、較煩瑣。

液氮保藏法是利用液氮（-196℃）的超低溫環(huán)境來保藏微生物的方法。?微生物在低于-130℃的低溫下新陳代謝趨于停止，通過添加保護劑如甘油或二甲基亞砜可保護微生物細胞，使其在超低溫環(huán)境下保持活性。?液氮保藏法是目前保存微生物菌種最可靠的方法。

砂土管保藏法是一種適用于生長孢子或芽孢的厭氧菌的保藏方法。該方法利用砂土中的水分和營養(yǎng)成分提供菌種生長的微環(huán)境，同時隔絕空氣，保持菌種的厭氧狀態(tài)。該方法操作簡單，將保藏菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后制成孢子懸液，將孢子懸液滴入已滅菌的砂土管中，孢子吸附在沙子上，再將砂土管置于真空干燥器中吸干水分，密封后置于-4℃冰箱中保藏。

（延伸閱讀作者：東北師范大學生命科學學院 張帆博士）

責任編輯：張鵬輝