細(xì)胞培養(yǎng)
cell culture
定義:在體外條件下,用培養(yǎng)液維持細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖的技術(shù)。
學(xué)科:細(xì)胞生物學(xué)_細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞工程
相關(guān)名詞:原代培養(yǎng) 細(xì)胞系 細(xì)胞株
圖片來(lái)源:視覺(jué)中國(guó)
【延伸閱讀】
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物學(xué)中重要且常用的技術(shù),主要用于大規(guī)模地培養(yǎng)細(xì)胞。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、合成代謝、增殖與分化等。
直接從機(jī)體分離出細(xì)胞后進(jìn)行的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)(primary culture),此時(shí)的細(xì)胞保留著原有細(xì)胞的基本性質(zhì),但通常將第1~10代培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)細(xì)胞。原代培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)過(guò)第一次傳代后即成為細(xì)胞系(cell line),如果可以連續(xù)培養(yǎng),則稱為連續(xù)細(xì)胞系,可培養(yǎng)50代以上,如果不能連續(xù)傳代或傳代次數(shù)有限,則稱為有限細(xì)胞系。通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的體外培養(yǎng)細(xì)胞稱為細(xì)胞株(cell strain),細(xì)胞株可培養(yǎng)40~50代。
細(xì)胞培養(yǎng)需注意3個(gè)方面:營(yíng)養(yǎng)、培養(yǎng)環(huán)境和代謝廢物的排除。體外培養(yǎng)細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)來(lái)自培養(yǎng)基,培養(yǎng)基含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的氨基酸、維生素和微量元素等。在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí),一般會(huì)向培養(yǎng)基中添加血清(牛血清為主),以補(bǔ)充促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和生物活性物質(zhì)。然而,由于血清中含有一些不明成分,對(duì)于有特殊目的的細(xì)胞培養(yǎng)是不利的,故可采取無(wú)血清培養(yǎng)基。為了保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng),需向無(wú)血清培養(yǎng)基中添加一些必要的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和生物活性物質(zhì)等。細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要模擬體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境:無(wú)菌、適宜的溫度、一定的滲透壓和氣體環(huán)境(氧氣和二氧化碳)。
二氧化碳對(duì)于維持細(xì)胞培養(yǎng)液的酸堿度非常重要,所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需使用二氧化碳培養(yǎng)箱。培養(yǎng)一段時(shí)間后,細(xì)胞的代謝產(chǎn)物集聚在培養(yǎng)液中,對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)不利,所以需要定期在無(wú)菌環(huán)境下更換細(xì)胞培養(yǎng)液。
細(xì)胞培養(yǎng)最重要的特點(diǎn)是在離體的條件下研究細(xì)胞的生命活動(dòng)規(guī)律,可通過(guò)人為改變培養(yǎng)條件研究細(xì)胞在某因素的影響下的生理功能變化,在科學(xué)研究、藥物研發(fā)、細(xì)胞治療等方面有著廣泛的應(yīng)用。但因?yàn)轶w外培養(yǎng)條件的局限性,體外培養(yǎng)的細(xì)胞與體內(nèi)的同類型細(xì)胞在形態(tài)與功能上不完全相同。隨著人們對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育的深入了解,未來(lái)可能會(huì)更加注重對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的優(yōu)化,使體外培養(yǎng)的細(xì)胞在形態(tài)及功能上更接近于體內(nèi)細(xì)胞。
(延伸閱讀作者:西華師范大學(xué)生態(tài)研究院 楊煒蓉博士)
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